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2023-04-1827288 次浏览
第四期 | 细胞工厂扩大化培养之进阶串联篇


细胞培养是一项耗费心思与精力的工作,

当小伙伴们养的细胞已经在细胞板或细胞瓶中茁壮成长之时,

就需要给他们换一个大户型的家。


上期我们聊到耐思细胞工厂密闭系统的优势以及如何定制所需的密闭系统,

初步解决了防污染的理论问题。


配件都有哪些?

如何利用小配件将细胞工厂玩出花?

如何从单排独栋进阶成高阶联排别墅?

进阶串联篇,即将加载......

PART 1

细胞工厂配件





耐思神器—生物工艺配件



液体传输管



转换接头


其他配件



PART 2

联排别墅指南



由于细胞工厂的培养特性,工艺放大过程中可以采用增加细胞工厂的数量的方式。


但当细胞工厂数量增多时,就会面临多次开盖操作造成的污染风险。


为了解决这个问题,我们就要用到一个很简单的方式:细胞工厂连连看。


将细胞工厂从单个的单位组成一组,并且利用配件将多个细胞工厂组合成一个半封闭/封闭的系统。


3个40层细胞工厂串联操作指南

(一种方式的演示)




PART 3

联排别墅使用教程

(以10层细胞工厂为例)



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进液操作

1. 将细胞工厂串联,将储液桶上的管路安装至蠕动泵,确保管路松紧适中,并与串联的细胞工厂管路连接。


2. 将管路上所有软管夹打开,打开蠕动泵。培养基通过管路进入串联的细胞工厂。操作过程中尽量避免产生气泡。

注:因进液速度不一样,我们可以通过关闭相应软管夹来控制进液量。

3. 当进液量足够后关闭蠕动泵,并关闭所有管路上软管夹。


4. 将软管从蠕动泵中取出,断开管路接口。将细胞工厂侧放,使液面平均分配到每层,进液管路侧朝下,空气滤器侧朝上,避免液体进入到空气滤器中。


5. 顺时针旋转90℃,使加液口朝上,静置后液体平均分配到每一层。缓慢将细胞工厂放至水平位置,将管路整理好或换成透气盖(过滤器组件亦可),然后放入细胞培养箱中孵育培养。

注:若管路末端热封,在正常环境下进行管路对接或断开即可,若管路末端为接头,应在百级环境下进行管路连接或断开。

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取液操作

1. 将细胞工厂串联并侧放(进出液管路侧朝下,空气滤器侧朝上),将储液桶上的管路安装至蠕动泵,确保管路松紧适中,并与串联的细胞工厂管路连接。


2. 打开所有软管夹,将蠕动泵开启,细胞培养液通过管路回收至储液桶。


3. 收取一定量液体后将细胞工厂倾斜,便于取液。

注:取液时最好将细胞工厂放置支架上,若没有支架,也可自行进行垫高,使细胞培养液更充分的流出。

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消化操作

1. 将管路与装有消化液的储液桶相连,打开蠕动泵,开始加入消化液。

注:因进液速度不一样,我们可以通过关闭相应软管夹来控制进液量。


2. 关闭蠕动泵并断开接口,然后将细胞工厂侧放,使消化液平均分配到每层,进液管路侧朝下,空气滤器侧朝上,避免液体进入到空气滤器中。


3. 顺时针旋转90℃,使加液口朝上,静置后液体平均分配到每一层。


4. 缓慢将细胞工厂放至水平位置,将每个细胞工厂微微摇晃,使消化液覆盖贴壁细胞,静置消化。消化完成后将管路与收集容器相连,打开所有软管夹后开启蠕动泵,倾斜细胞工厂后开始液体转移。

注:可以通过细胞工厂支架将底部抬高,防止液体残留,也可自行进行垫高,使消化液更充分的流出。

 

5. 液体收集完成后关闭蠕动泵。由于生产工艺的区别,在使用细胞工厂进行大规模细胞培养时可能会采用不同的串联方式,不同的生物工艺配件。


由于生产工艺的区别,

在使用细胞工厂进行大规模细胞培养时可能会采用不同的串联方式,

不同的生物工艺配件。


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