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2026-05-18172 次浏览
耐思课堂 | 细胞传代怎么做?新手必看的基础操作指南

01 什么是细胞传代?

随着细胞不断生长,培养瓶中的细胞数量会逐渐增加。当细胞达到一定密度后:

营养会逐渐不足

代谢废物开始累积

细胞之间空间不足

此时,如果继续培养,就容易导致:

生长速度下降

细胞状态变差

甚至出现死亡或分化异常

因此,需要将部分细胞转移到新的培养环境中继续培养,

这一过程就称为——

细胞传代

简单来说:👉 就是给细胞“换一个更宽敞的新环境”。


02贴壁细胞为什么需要“消化”

对于贴壁细胞来说,细胞会牢固附着在培养表面。

因此在传代前,需要先让细胞从培养表面脱离。

实验中通常会使用:胰酶(Trypsin)或其他细胞消化液对细胞进行短时间处理。

这一过程称为:

细胞消化

很多新手最容易出现的问题就是:

👉 “消化过度”。

如果消化时间过长,可能导致:

细胞膜受损

贴壁能力下降

细胞活率降低

因此,在显微镜下观察到:

细胞边缘变圆

细胞开始脱落

通常就需要及时终止消化。


03 细胞传代的基础流程

一个标准的贴壁细胞传代流程通常包括:

1⃣ 观察细胞状态

确认:

细胞密度是否合适

是否存在污染

细胞形态是否正常

通常建议在:

👉 70%–90%融合度 时进行传代。

2⃣ 吸除旧培养基

去除培养过程中产生的代谢废物。

3⃣ PBS清洗

用于去除残留血清,避免影响后续消化效果。

4⃣ 加入消化液

使贴壁细胞逐渐脱离培养表面。

5⃣ 终止消化并重悬细胞

加入含血清培养基终止消化,轻柔吹打重悬。

6⃣低速离心去除上清

用新鲜培养基重悬

7⃣按比例接种至新培养器皿根据实验需求进行分瓶或扩增培养。



特别提醒:实验中新手传代最容易踩的坑

❌ 吹打过猛

容易造成机械损伤。

❌ 消化不足或过度

都会影响后续贴壁与增殖。

❌ 细胞密度控制不合理

过稀或过密都可能导致状态波动。

❌ 忽视培养表面稳定性

对于贴壁细胞来说,培养表面直接影响:

细胞附着

铺展

生长状态

因此,稳定的培养耗材非常重要。


04 耐思在细胞传代中的产品支持


围绕细胞培养的常见应用场景,耐思提供多种稳定、可控的一次性耗材解决方案:

细胞培养瓶 / 培养板

高透明度,便于观察细胞形态与贴壁状态

稳定的表面性能,支持贴壁细胞培养需求

针对贴壁细胞培养需求,耐思细胞培养类耗材提供 TC 处理与未 TC 处理 两种规格,可根据具体实验场景灵活选购。TC(Tissue Culture)表面处理通过对高品质聚苯乙烯(PS)基材表面进行受控改性,从而增强细胞附着能力,促进贴壁细胞快速铺展与稳定生长。

离心管 / 冻存管

良好密封性,降低细胞转移与储存过程中的风险

适用于细胞收集、冻存及复苏等基础操作

血清移液管 / 吸头

内壁光滑,液体残留少

超强疏水性、超低吸附性

帮助降低人为操作带来的不确定因素


产品细胞培养类耗材均保证:

  • 无菌
  • 无热源/内毒素

无细胞毒性、

无 DNA、无 DNase/RNase

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