01 什么是细胞传代?
随着细胞不断生长,培养瓶中的细胞数量会逐渐增加。当细胞达到一定密度后:
营养会逐渐不足
代谢废物开始累积
细胞之间空间不足
此时,如果继续培养,就容易导致:
生长速度下降
细胞状态变差
甚至出现死亡或分化异常
因此,需要将部分细胞转移到新的培养环境中继续培养,
这一过程就称为——
细胞传代
简单来说:👉 就是给细胞“换一个更宽敞的新环境”。
02贴壁细胞为什么需要“消化”
对于贴壁细胞来说,细胞会牢固附着在培养表面。
因此在传代前,需要先让细胞从培养表面脱离。
实验中通常会使用:胰酶(Trypsin)或其他细胞消化液对细胞进行短时间处理。
这一过程称为:
细胞消化
很多新手最容易出现的问题就是:
👉 “消化过度”。
如果消化时间过长,可能导致:
细胞膜受损
贴壁能力下降
细胞活率降低
因此,在显微镜下观察到:
细胞边缘变圆
细胞开始脱落
通常就需要及时终止消化。
03 细胞传代的基础流程
一个标准的贴壁细胞传代流程通常包括:
1⃣ 观察细胞状态
确认:
细胞密度是否合适
是否存在污染
细胞形态是否正常
通常建议在:
👉 70%–90%融合度 时进行传代。
2⃣ 吸除旧培养基
去除培养过程中产生的代谢废物。
3⃣ PBS清洗
用于去除残留血清,避免影响后续消化效果。
4⃣ 加入消化液
使贴壁细胞逐渐脱离培养表面。
5⃣ 终止消化并重悬细胞
加入含血清培养基终止消化,轻柔吹打重悬。
6⃣低速离心去除上清
用新鲜培养基重悬
7⃣按比例接种至新培养器皿根据实验需求进行分瓶或扩增培养。
特别提醒:实验中新手传代最容易踩的坑
❌ 吹打过猛
容易造成机械损伤。
❌ 消化不足或过度
都会影响后续贴壁与增殖。
❌ 细胞密度控制不合理
过稀或过密都可能导致状态波动。
❌ 忽视培养表面稳定性
对于贴壁细胞来说,培养表面直接影响:
细胞附着
铺展
生长状态
因此,稳定的培养耗材非常重要。
04 耐思在细胞传代中的产品支持
围绕细胞培养的常见应用场景,耐思提供多种稳定、可控的一次性耗材解决方案:
细胞培养瓶 / 培养板
高透明度,便于观察细胞形态与贴壁状态
稳定的表面性能,支持贴壁细胞培养需求
针对贴壁细胞培养需求,耐思细胞培养类耗材提供 TC 处理与未 TC 处理 两种规格,可根据具体实验场景灵活选购。TC(Tissue Culture)表面处理通过对高品质聚苯乙烯(PS)基材表面进行受控改性,从而增强细胞附着能力,促进贴壁细胞快速铺展与稳定生长。
离心管 / 冻存管
良好密封性,降低细胞转移与储存过程中的风险
适用于细胞收集、冻存及复苏等基础操作
血清移液管 / 吸头
内壁光滑,液体残留少
超强疏水性、超低吸附性
帮助降低人为操作带来的不确定因素
产品细胞培养类耗材均保证:
无细胞毒性、
无 DNA、无 DNase/RNase