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细胞消化与解离试剂
在组织细胞的体外培养和原代细胞培养的过程中,需要使用组织细胞消化与解离试剂使组织细胞得以解离和分散,以便进行单个细胞悬液的制备或贴壁生长传代细胞培养。常用的消化液有胰蛋白酶(Trypsin)-EDTA、胶原酶和分散酶等。NEST®提供多种效能不同的细胞消化液,以满足您在原代细胞分离和贴壁细胞传代培养中的不同需求。
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胰蛋白酶(Trypsin)是一种丝氨酸水解酶,它能够把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羟基侧切段,水解细胞间的蛋白质,破坏细胞间的连接,从而使组织或贴壁细胞离散成单个细胞。胰酶分散细胞的活性与组织或细胞的特性、胰酶浓度、温度和作用时间有关,在pH8.0和37°C时,胰酶的作用能力最强。因此,在使用胰酶时,应当把握好浓度、温度和时间,以免消化过度造成细胞损伤。一般常用胰酶的工作浓度为0.25%,而半贴壁细胞或对胰酶敏感的细胞常采用低浓度(0.05%)的胰酶进行细胞消化。由于EDTA能够螯合Ca2+和Mg2+,从而破坏细胞连接促进细胞的解离,因此在胰酶溶液中常常会加入一定量的EDTA混合使用,以增强解离效果。对于EDTA可能会干扰后续的测试分析时,推荐选择不含EDTA的消化液。具体请参考以下表格选择合适的胰蛋白酶产品。
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0.25% Trypsin-no EDTA,无酚红
更新日期:2023-09-04
0.25% Trypsin-no EDTA,无酚红
更新日期:2023-09-04
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更新日期:2023-09-04
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